
提示词
依照下面的话绘制一个流程图:周细胞对血脑屏障(BBB)通透性的影响及其分子机制
① 周细胞缺陷型小鼠模型的构建与验证:建立PDGFR-β基因敲除的小鼠模型(Pdgfr-β+/-),通过免疫组化、Western blot等方法,验证模型中周细胞的缺失情况。
② BBB通透性的体内评估:采用伊文思蓝染色法和荧光标记的葡聚糖注射法,评估BBB的通透性变化。免疫染色检测血浆蛋白外漏(IgG、纤维蛋白原),评估BBB的功能。
③ 组织学和分子生物学分析:大脑组织进行组织学分析,观察BBB的超微结构变化,包括内皮细胞、周细胞和星形胶质细胞。同时,利用Western blot、实时定量PCR等技术,检测紧密连接蛋白(Claudin-5、Occludin、ZO-1、VE-cadherin)、转运蛋白(Caveolin-1、PLVAP、Mfsd2a)及基底膜与细胞外机制重塑蛋白(Collagen IV、Laminin、MMP-2/9)的表达水平,分析周细胞缺失对BBB分子组成的影响。


























